食品微生物污染是食品安全核心风险,传统检测方法周期长,难以满足快速监管、批量筛查需求。快速检测技术凭借高效、精准的优势,广泛应用于食品生产、流通、监管环节,需严格遵循标准规范,确保检测结果可靠。
一、核心检测标准体系
食品微生物快速检测形成国标、行标与国际标准协同体系。国内核心标准包括 GB 4789 系列补充标准,如 GB 4789.31-2020《食品安全国家标准 食品微生物学检验 沙门氏菌检验》,包含快速检测方法验证要求;HJ 1001-2018《水质 微生物指标的测定 平皿计数法》,为食品加工用水快速检测提供依据。行业标准方面,SN/T 1870-2007《进出口食品中致病菌快速检测方法 实时荧光 PCR 法》,适用于进出口食品快速筛查;国际标准 ISO 22174-2019《食品链微生物学 实时荧光 PCR 法检测食源性病原体》,规范荧光定量 PCR 技术应用,确保全球检测结果可比。
二、主流快速检测技术及操作规范
(一)实时荧光定量 PCR 技术
基于核酸扩增原理,快速检测目标微生物基因片段,检测周期 2-4 小时,较传统方法缩短 80% 以上。依据 GB 4789.31-2020,针对沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等致病菌,设计特异性引物与探针,通过荧光定量 PCR 仪实时监测扩增曲线,定量微生物含量。实操要点:样品前处理需充分裂解微生物细胞,提取核酸纯度 OD260/OD280 需在 1.8-2.0 之间;设置阳性对照、阴性对照,避免假阳性、假阴性结果;扩增条件需严格控制退火温度、循环次数,确保扩增效率稳定。该技术适用于批量食品致病菌筛查,检测限可达 10CFU/mL。
(二)免疫胶体金技术
基于抗原抗体特异性结合原理,制备检测试纸条,快速定性检测微生物,操作简便、无需专业设备,15-20 分钟可出结果。依据 SN/T 2754.1-2011,针对大肠杆菌 O157:H7、沙门氏菌等,将样品滴加至试纸条,观察质控线、检测线显色情况,两条线均显色为阳性,仅质控线显色为阴性。实操要点:样品需按比例稀释,避免基质干扰;试纸条需在有效期内使用,储存温度 2-8℃,避免受潮;检测环境温度控制在 15-30℃,确保抗原抗体结合充分。该技术适用于现场快速筛查,如农贸市场、餐饮企业食品安全自检。
(三)生物传感器技术
利用微生物代谢产物与传感器的特异性反应,快速定量检测微生物总量,响应时间短(≤30 分钟)、灵敏度高。依据 ISO 16140-2021,通过电化学传感器、光学传感器,检测微生物代谢产生的电流、荧光信号,量化微生物含量。实操要点:传感器需提前校准,确保信号稳定性;样品需预处理去除杂质,避免干扰传感器响应;检测后及时清洁传感器,延长使用寿命。该技术适用于食品加工过程在线监测,实时反馈微生物污染情况。
(四)LAMP 等温扩增技术
在恒温(60-65℃)条件下实现核酸扩增,无需 PCR 仪,检测周期 1 小时左右,特异性强。依据 GB/T 38164-2019,针对食源性致病菌,通过等温扩增仪扩增目标基因,结合荧光染料或浊度法判断结果。实操要点:严格控制反应温度,波动不超过 ±1℃;引物设计需确保特异性,避免非目标基因扩增;反应体系需无菌操作,防止污染。该技术适用于基层监管、野外作业食品微生物快速检测。
三、不同场景应用要求
食品生产企业自检:优先采用免疫胶体金技术(现场快速筛查)与实时荧光定量 PCR 技术(批量精准检测),确保原料、半成品、成品微生物指标达标,检测结果需留存归档,可追溯。食品安全监管抽检:采用实时荧光定量 PCR 技术进行精准筛查,阳性样品需通过传统生化鉴定法复核,确保检测结果准确性,避免误判。食品加工用水检测:采用生物传感器技术在线监测,微生物总量需符合 GB 5749-2022《生活饮用水卫生标准》,实时调整水处理工艺。
四、结果判定与质量控制
判定需对照 GB 2726-2016《食品安全国家标准 熟肉制品》、GB 19298-2014《食品安全国家标准 包装饮用水》等对应食品标准,快速检测阳性样品需用传统方法复核,阴性样品可判定为合格。质量控制要点:检测设备定期校准,试剂在有效期内使用;平行样测试相对偏差≤10%,空白对照无阳性信号;检测人员需经专业培训,熟悉操作规范,确保检测过程合规。上海百检检测中心配备荧光定量 PCR 仪、生物传感器等设备,熟练掌握各类快速检测技术,可提供食品微生物快速筛查与复核检测服务,助力食品安全高效管控。







